ＬＣＴ

リンパ球細胞毒試験；ＬＣＴ；（lymphocyte cytotoxicity test）

１．ＨＬＡ抗原検査

【原理】

　補体存在下でヒトリンパ球上のＨＬＡ抗原とＨＬＡ抗血清中の抗体が反応した時、活性化された補体によってリンパ球の細胞膜に穴があき色素（Terasaki法ではエオジン、二重蛍光染色法では蛍光色素）により染色された死細胞数の割合によりＨＬＡタイピングを行う。

・ＨＬＡクラスⅠ抗原は被細胞として全リンパ球又はＴリンパ球を用いる。
・ＨＬＡクラスⅡ抗原は被細胞としてＢリンパ球を用いる。

【リンパ球分離】

１．リンパ球分離液（フィコ－ル液）を用いた比重遠沈法・・・全リンパ球
２．免疫磁気ビ－ズ法、Ｔ，Ｂクイック法、イムノビーズ法・・・Ｔ，Ｂリンパ球

● 新鮮な血液から、できるだけ早く分離を行う。
● 抗凝固剤（ＡＣＤ－Ａ液、ＣＰＤ液）を用い、１０ｍｌ採血
● 保存する場合は、室温放置

＜ＨＬＡ抗原既知のリンパ球との反応より判定＞

● 抗血清（抗体）と反応したリンパ球は、補体の作用により細胞膜が破壊され、膨化し、
　エオジンに染まり黒く見え、生細胞は白く光って立体的に見える。
　反応スコアをタイピングシートに記録して判定する。

２．ＨＬＡ抗体検査、交差試験

　供血者のリンパ球（ＨＬＡ抗体スクリーニングの場合はＨＬＡタイプ既知パネルリンパ球を選択して１２～２４種使用）と患者血清との反応を、ＬＣＴまたはＡＨＧ－ＬＣＴ（抗ヒト免疫グロブリンＬＣＴ　anti-human immunoglobulin - ＬＣＴ）でみる。

　注）ＬＣＴは補体を用いた血清反応であるため、補体非結合性あるいは補体結合性Ｉｇ
　　Ｇ抗体であっても弱いＨＬＡ抗体で細胞表面の抗原分布状態により抗原に結合した抗
　　体によって補体が活性化されない場合は、抗体を検出することは不可能。
★ ＨＬＡ抗体を検出できる最も信頼できる方法は、クームス法の原理を用いた
　ＡＨＧ－ＬＣＴである。

抗ＨＬＡ抗体の検出

● 補体と結合しない抗体や低力価抗体は、ＡＨＧ－ＬＣＴ（抗ヒト免疫グロブリン血清
　＝　ＡＨＧ；anti human immunogloburin を加えたＬＣＴ）で検出される。

白血球血小板抗体についてにもどる

輸血にもどる