ＨＬＡ抗原

　ＨＬＡ抗原 human leukocyte antigenは、ヒト第６染色体短腕上存在する、主要組織適合性複合体major histocompatibility complex （ＭＨＣ）遺伝子領域によりコードされ、ＭＨＣ領域はクラスⅠ、Ⅱ、Ⅲに分類されている。

● クラスⅠ抗原；クラスⅠ遺伝子のＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｅ、Ｆ、Ｇの６座によってコー
　　　　　　　　ドされ、クラスⅠａ抗原（ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃ）、クラスⅠｂ抗原
　　　　　　　　（ＨＬＡ－Ｅ、Ｆ、Ｇ）に分けられる。
●クラスⅡ抗原；クラスⅡ抗原のＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱ、ＤＰ抗原はクラスⅡ遺伝子領域の
　　　　　　　　ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱ、ＤＰの３座によってコードされる。

ＨＬＡの細胞分布　

・クラスⅠ抗原；ヒトでは、ほとんどの有核細胞に表現される。
　（中枢神経系のニューロン、角膜上皮膵外分泌細胞には抗原活性がみられていない。
　ＨＬＡ－Ｇ抗原は母体と胎児の接点である胎盤トロホブラストに特異的に発現されて
　いる。胎盤トロホブラストには他のクラスⅠ、Ⅱ抗原は発現していない）
・クラスⅡ抗原；Ｂリンパ球、活性化Ｔリンパ球、単球などの限られた細胞に表現され
　る。

HLA詳細

ＨＬＡ抗原の検出

１）血清学的方法；ＬＣＴ（lymphocyte cytotoxicitytest）リンパ球細胞毒試験
　　　対象抗原：ＨＬＡクラスⅠ抗原のＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃ抗原、
　　　　　　　　ＨＬＡクラスⅡ抗原のＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱ抗原

２）細胞学的方法；
　・　ＭＬＣ（mixed lympphocyte culturetest）リンパ球混合培養試験
　　　　対象抗原：ＨＬＡ－Ｄ抗原
　・　二次刺激ＭＬＣ反応によるＰＬＴ（primed lymphocyte typing）
　　　　対象抗原：ＨＬＡ－ＤＰ抗原
　・　ＨＬＡクラスⅠ抗原では、ＣＴＬ（cytotoxic T lymphocyte）細胞傷害性Ｔリンパ
　　　球クローンがＨＬＡクラスⅠ抗原の微妙な差異を認識出きることを利用した細胞性
　　　リンパ球融解反応（ＣＭＬ；cell-mediated lympholysis）などが研究に利用されて
　　　いる。

３）免疫生化学的方法；ＨＬＡ抗原分子の多彩な等電点の違いを利用して、蛋白質レベル
　で検出する方法

４）ＤＮＡタイピング検査法;特定の遺伝子領域を指数関数的に増幅するＰＣＲを用いて
　タイピングする。
● ＰＣＲ法　１．熱変性　９３～９６℃の高温で２本鎖ＤＮＡを１本鎖にする
　　　　　　２．アニ－リング温度を急速に４０～５５℃に下げると、プライマーが鋳型
　　　　　　　　１本鎖ＤＮＡにハイブリッド結合する。
　　　　　　３．伸張反応　７２℃で数分反応させるとプライマー部位からＤＮＡ相補鎖
　　　　　　　　が合成されていく。
● タイピング法　（１）ＰＣＲ－ＳＳＰ
　　　　　　　　（２）ＰＣＲ－ＳＳＯＰ
　　　　　　　　（３）ＰＣＲ－ＲＦＬＰ
　　　　　　　　（４）ＰＣＲ－ＳＳＣＰ

ＨＬＡ抗体の検出

　血小板を頻回に繰り返し輸血すると、患者体内に抗ＨＬＡ抗体が産生され、血小板輸血の効果が著しく低下する、いわゆる血小板輸血不応状態（ＰＴＲ）となる。また抗ＨＬＡ抗体は発熱、頭痛、悪心などの非溶血性輸血反応の原因ともなる。

ＨＬＡ抗体検査、交差試験

　供血者のリンパ球（ＨＬＡ抗体スクリーニングの場合はＨＬＡタイプ既知パネルリンパ球を選択して１２～２４種使用）と患者血清との反応を、ＬＣＴまたはＡＨＧ－ＬＣＴ（抗ヒト免疫グロブリンＬＣＴ　anti-human immunoglobulin - ＬＣＴ）でみる。

　注）ＬＣＴは補体を用いた血清反応であるため、補体非結合性あるいは補体結合性
　ＩｇＧ抗体であっても弱いＨＬＡ抗体で細胞表面の抗原分布状態により抗原に結合した
　抗体によって補体が活性化されない場合は、抗体を検出することは不可能。
● ＨＬＡ抗体を検出できる最も信頼できる方法は、クームス法の原理を用いたＡＨＧ－
　ＬＣＴである。

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