院内での検体の流れ
１．ＡＢＯ式血液型
＜オモテ試験＞
１．赤ヴィダ－ル管に、１ｍｌ採血された検体を、遠沈分離
２．血球を生食にて１回以上洗浄し、３～５％生食液浮遊血球液を作成する。
３．２本の試験管に抗Ａ血清、抗Ｂ血清を各１滴滴下する。
４．血球浮遊液を各抗血清に１滴ずつ加える。
５．３４００ｒｐｍ／１５秒または、１０００ｒｐｍ／１分遠沈。
６．明るく白い背景で凝集の観察判定を行う。
★または、ガラス凝集板に抗Ａ、抗Ｂ血清１滴＋１０％生食液浮遊血球液１滴を加え、
撹拌混和しながら２分以内に判定。
＜ウラ試験＞
１．赤ヴィダ－ル管に、１ｍｌ採血された検体を、遠沈分離
２．血球を生食にて１回以上洗浄し、３～５％生食液浮遊血球液を作成する。
３．３本の試験管に患者血清を各２滴ずつ滴下する。
４．それぞれの試験管に、Ａ1血球、Ｂ血球、Ｏ血球を１滴ずつ加える。
５．３４００ｒｐｍ／１５秒または、１０００ｒｐｍ／１分遠沈。
６．明るく白い背景で凝集の観察判定を行う。
＊判定は”０”、”Ｗ＋”、”１＋”、”２＋”、”３＋”、”４＋”、”Ｈ”で記載する。
２．Ｒｈ（Ｄ）血液型
１．赤ヴィダ－ル管に、１ｍｌ採血された検体を、遠沈分離
２．血球を生食にて１回以上洗浄し、３～５％生食液浮遊血球液を作成する。
３．２本の試験管に抗Ｒｈ（Ｄ）血清、Rh-hrコントロ－ルを各１滴滴下する。
４．血球浮遊液を各抗血清に１滴ずつ加える。
５．３４００ｒｐｍ／１５秒または、１０００ｒｐｍ／１分遠沈。
６．明るく白い背景で溶血の有無、凝集の観察判定を行う。
３．直接抗グロブリン試験
抗凝固剤入りバイアル瓶に採血された血算用検体の一部を、生食にて３回洗浄しク－ムス血清を加えて凝集の確認を行う。
陰性の場合；ク－ムス血球を１滴滴下し、凝集することを確認
陽性の場合；広範囲ク－ムスでの反応が陽性であった場合には、抗ヒトＩｇＧ、抗Ｃ３
b・d、抗Ｃ３dの各ク－ムス血清との反応を検査する
＊抗凝固剤を使用しない採血では、試験管内補体感作を受けるので注意。
４．成人同型間接ク－ムス
生後１週間以内で、Ｔ－ｂｉｌが高値の新生児において、母児間で、ＡＢＯ式血液型不適合が疑われる場合（母親；Ｏ、患児Ａ型または、Ｂ型）には、成人同型との間接クームス試験を行う。
１．赤ヴィダ－ル管に、２～３ｍｌ採血された検体を、遠沈分離。
２．患児血球および、成人Ａ血球または、成人Ｂ血球を生食にて３回洗浄し、３～５％
生食液浮遊血球液を作成する。
３．２本の試験管に患児血清を各２滴滴下する。
４．１本の試験管にＡ型または、Ｂ型血球浮遊液を１滴加え、もう１本の試験管には対照
として患児血球浮遊液を加える。
５．３４００ｒｐｍ／１５秒または、１０００ｒｐｍ／１分遠沈。
６．明るく白い背景で溶血の有無、凝集の観察判定を行う。
陰性の場合；ク－ムス血球を１滴滴下し、凝集することを確認
陽性の場合；抗体スクリーニングにて不規則抗体の有無を確認
＊ＡＢＯ不適合と確認された場合には、患児血清を生食にて倍々希釈して、存在する
免疫抗体の力価を測定し、交換輸血が必要な場合の選択血液を確定する。
交換輸血選択血液；Ｏ型赤血球と、ＡＢ型血漿との合成血
合成血が間に合わない場合は、Ｏ型ＭＡＰ赤血球＋ＡＢ型新鮮凍結血漿
５．抗体スクリ－ニング
１．赤ヴィダ－ル管に、３ｍｌ採血された検体を、遠沈分離
２．血球を生食にて１回以上洗浄し、３～５％生食液浮遊血球液を作成する。
３．患者血清を、マジックにて加える血球名を記載した４本の試験管に２滴ずつ分注す
る。
４．４本の試験管に Selectogen Ⅰ、Selectogen Ⅱ、ディエゴＡ血球、患者血球浮遊液
各１滴を滴下する。
５．「方 法」生食法
ブロメリン法
ク－ムス法
６．３４００ｒｐｍ／１５秒または、１０００ｒｐｍ／１分遠沈。
７．明るく白い背景で溶血の有無、凝集の観察判定を行う。
陰性の場合；ク－ムス血球を１滴滴下し、凝集することを確認。
陽性の場合；パネルセルを用い、消去法にて抗体の同定を行う。
＊不規則抗体が証明された場合は、その旨、臨床側にレポートにて報告し、抗体陰性
血液の使用を促す。
＊交差適合試験は、同定された不規則抗体を一番感度よく検索可能な方法を用いて行
う。
６．交差適合試験（溶血性輸血副作用の防止）
輸血前検査として、溶血性輸血副作用防止に重要な検査
輸血用血液と患者血液との間に血液型抗体に起因する抗原抗体反応が起こるかを試験管内で検査し、輸血による副作用を未然に防止する。
＊主試験と副試験がある。
＊主試験は、患者血清と供血者血球との反応である。
＊副試験は、患者血球と供血者血漿との反応である。
＊赤十字血液センタ－で供給される血液に対しては、不規則同種抗体の有無の確認が
されているので、患者のＡＢＯ、Ｒｈo（Ｄ）血液型および不規則同種抗体が存在し
ないことを確認すれば副試験は省略できる。
「原 理」 主試験：受血者血清 ＋ 供血者血球
副試験：供血者血漿 ＋ 受血者血球
「方 法」生食法
ブロメリン法
ＰＥＧ
ＬＩＳＳ
ク－ムス法
＊ＭＡＰの抗凝固作用はＣＰＤによる。
＊交差試験用の検体は、血液型検査検体とは別に採取する。
（検体採取ミスを防ぐため）
＊溶血反応には補体を必要とするので、採血後７２時間以内の血液を用い、検体は不活
化してはならない。
＊溶血血液は、溶血反応が正しく検査できないので検体として不適当。
＊血球と血清は分離して血球は冷蔵庫に、血清は冷凍庫に保存。
＊頻回輸血の患者は常に新しく採血した血液を用いる。
＊Ｒｈｏ（Ｄ）型不適合は検出不能。
【通常時の検査法】
１．血液型検査
（ＡＢＯ式血液型オモテ・ウラ試験、Ｒｈ（Ｄ）血液型）
２．抗体スクリ－ニング
（不規則抗体陽性の場合はパネルセルを用い抗体同定および、患者不規則抗体陽性
血液型の確認）
３．ク－ムス法または、ブロメリン法による交差試験
（抗体スクリ－ニングにて不規則抗体陽性の場合は、その抗体の検出に適した交差
試験の方法を用いて交差試験を行う）
【緊急時の場合】
１．抗体スクリ－ニングが実施されている場合
ａ．Ｔ＆Ｓの場合
患者と供血者のＡＢＯ式血液型オモテのみ確認、または生食法のみの交差試験
実施によるＡＢＯ式血液型一致の確認
ｂ．通常緊急時
生食ク－ムス法にて交差適合試験
ｃ．手術時等の緊急時
患者と供血者のＡＢＯ式血液型オモテ・ウラ確認および、生食法のみの交差試験
にて血液使用許可を出し、引き続きク－ムス法による交差試験を実施
２．抗体スクリ－ニング未実施の場合
ａ．通常緊急時
血液型検査（ＡＢＯ式血液型オモテ・ウラ試験、Ｒｈ（Ｄ）血液型）および、
生食ク－ムス法にて交差適合試験
ｂ．手術時等の緊急時
患者と供血者のＡＢＯ式血液型オモテ・ウラ試験・Ｒｈ（Ｄ）血液型確認およ
び、生食法のみの交差試験にて血液使用許可を出し、引き続きク－ムス法による
交差試験を実施
【ＡＢＯ不適合、Ｒｈ不適合が疑われる場合の検査と選択血液】
・ＡＢＯ不適合疑い；
１．両親のＡＢＯ式および、Ｒｈo（Ｄ）血液型の確認
２．母親の妊娠歴および、輸血歴
３．母親に妊娠歴または、輸血歴がある場合は臍帯血または、患児血清を用いた抗体
スクリ－ニングの実施
４．ＩｇＧ抗体が検出された場合は、抗体価の測定
＊交換輸血時の適合血：Ｏ型血球とＡＢ型血漿の合成血を用いる。
合成血が間に合わないときは、Ｏ型血球ＭＡＰとＡＢ型新鮮凍結血漿を用いる。
＊可能ならば輸血する赤血球は母親血清との間で交差適合試験を行う。
・Ｒｈ不適合疑い；
１．両親のＡＢＯ式および、Ｒｈo（Ｄ）血液型の確認
２．母親の妊娠歴および、輸血歴
３．Ｒｈ５因子の検索
４．母親に妊娠歴または、輸血歴がある場合は臍帯血または、患児血清を用いた抗体
スクリ－ニングの実施
５．ＩｇＧ抗体が検出された場合は、抗体価の測定
＊交換輸血時の適合血 ： ＡＢＯ型血液は児と同型のＲｈo(Ｄ）陰性血を用いる。
＊可能ならば輸血する赤血球は母親血清との間で交差適合試験を行う。
当院のアルブミン試薬；ｐＨ７．２、重合２０．９％蛋白濃度のアルブミン
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