血小板特異抗原

　血小板膜表面に存在する血小板同種（アロ）抗原には、ＨＰＡ抗原（human platet antigens;ヒト血小板抗原）、ＨＬＡ抗原（human leukocyte antigens;ヒト白血球抗原）、ＡＢＯ血液型抗原、Ｌｅｗｉｓ抗原、Ｐ抗原、Ｉ抗原などの同種抗原が存在する。これらの血小板同種抗原による同種免疫感作が原因で、血小板輸血不応（ＰＴＲ）、新生児血小板減少性紫斑病（ＮＡＩＴＰ）、輸血後紫斑病（ＰＴＰ）などの病態に関係していることが明らかになっている。

血小板特異抗原（ＨＰＡ；human plateletantigen）

　血小板特異抗原系は、１９９０年国際輸血学会（ＩＳＢＴ）、国際血液学会（ＩＣＳＨ）の提唱で、従来の発端者の名にちなんで名づけた独自の名称から、混乱を避けるための国際的統一名称ＨＰＡに名称が整理された。現在ＨＰＡ１～１３までの抗原系が認められている。

【血小板特異抗原の分類とその遺伝子解析】

血小板抗原・抗体検査法

検体

　凝固血液から分離した血清を用いる。
　（少しでも血漿成分が含まれていると偽陽性となるため、トロンビン処理が必要で
　　ある。）

検査法

① 混合受身凝集法（ＭＰＨＡ）
　マイクロプレートＵ底に血小板を固相し被検血清を感作後、洗浄し抗ヒトＩｇＧ抗体（ＩｇＭ、ＩｇＡ）をラベルした固定ヒツジ血球（指示血球）を加え、室温で反応させて判定する。わが国では標準的検査法として最も広く普及している。
抗ＨＬＡ抗体と抗ＨＰＡ抗体を同時に検出できる。
反応が陽性の場合は抗ＨＬＡ抗体と抗ＨＰＡ抗体の鑑別が必要である。

　＝　抗ＨＬＡ抗体と抗ＨＰＡ抗体の鑑別　＝
　　0.8Ｍクロロキン溶液をプレートに１時間反応させ、ＨＬＡ抗原を不活化して５回洗浄
　　し、検査に用いる。反応が陰性化または減弱した場合はＨＬＡ抗体を疑う。
　※0.8Ｍクロロキン溶液
　　クロロキンジホスフェイト（ＳＩＧＭＡ社）４１ｇにダルベッコＰＢＳ１００ｍｌ
　　に溶解し、５Ｎ　ＮａＯＨでｐＨ5.0に合わせる（４℃で数ヶ月保存可能）

● 抗ＨＬＡ抗体の検出にはリンパ球細胞毒試験（ＬＣＴ；lymphocyte cytoto-xicity
　test）、あるいは抗グロブリン異種血清を用いることで感度を２～３倍上昇させた
　ＡＨＧ－ＬＣＴ法が用いられる。

② ＭＡＩＰＡ法
　血小板と被検血清を反応させた後、血小板の各糖蛋白に対するモノクローナル抗体（ＧＰⅠａ/Ⅱａ、ＧＰⅠｂ、ＧＰⅡｂ、ＧＰⅡｂ/Ⅲａ、ＧＰⅣなど）を反応させ抗原糖蛋白をマークする。次に血小板膜を可溶化後、抗マウスＩｇＧ、ＩｇＭ抗体をコートしたプレートに分注し、酵素抗体法で検出する。

③ 蛍光抗体法（ＰＳＩＦＴ－ＦＣＭ）
　血小板をパラホルムアルデヒドで固定した後、固定血小板と被検血清を反応させて、洗浄後蛍光標識抗ヒトＩｇＧ、ＩｇＭ抗体を加え、血小板に結合した蛍光強度を蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリー（ＰＳＩＦＴ/ＦＣＭ）で測定する。

　※ 被検血清の代わりにＨＰＡ特異性既知の抗血清を用いることで、被検血小板型
　　タイピングに応用できる。

白血球血小板抗体についてにもどる

輸血にもどる